一、贴壁生长与悬浮生长的细胞类型
在活体内的细胞移至体外培养时,大多数细胞采用贴壁生长方式。此类细胞主要包括正常细胞与肿瘤细胞,如成纤维细胞、骨组织(包括骨骼及软骨)、心肌、平滑肌、肝脏、肺部、肾脏、乳腺、皮肤、神经胶质细胞、内分泌细胞、黑色素细胞及多种肿瘤细胞。而悬浮生长的细胞相对较少,主要包括某些来源于血液、脾脏或骨髓的培养细胞,尤其是血液中的白细胞及癌症细胞。
二、贴壁细胞与悬浮细胞的培养条件差异
在培养过程中,贴壁细胞需要添加血清,而悬浮细胞则可以不加血清,这一条件性差异在细胞培养的效果上至关重要。
三、贴壁细胞与悬浮细胞的培养方式
悬浮细胞通常使用各种摇瓶或反应器进行培养,而贴壁细胞则多采用方瓶或孔板,在使用微载体的情况下,亦可进行反应器培养。
四、贴壁细胞与悬浮细胞的传代方法
由于贴壁细胞生长时受到接触抑制,满瓶后会紧密粘附,提取时需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,以使其分散并取出,之后再放入新的培养瓶继续培养。相对而言,悬浮细胞虽也可产生轻微的贴壁现象,但并不牢固,通常可以通过吹打的方式令其分离,便于传代。
五、显微镜下贴壁细胞与悬浮细胞的观察差异
在显微镜观察中,贴壁细胞可进一步细分为上皮细胞型与成纤维细胞型。贴壁细胞在培养瓶底部延展,形成梭形或不规则三角形、扇形,且在摇动培养液时,细胞基本保持静止。相比之下,悬浮细胞则漂浮在培养液中,呈圆形,并在摇动培养液时随之移动。
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